Les échantillons dilués sont incubés dans les microcuves coatées avec l'HABP.

Pendant cette étape, l'acide hyaluronique se fixe sur les micropuits.

Après lavage, un conjugué HABP est ajouté et incubé, un second lavage élimine ensuite le conjugué non fixé. On ajoute alors un substrat chromogène pour développer une réaction colorée. L'intensité de la couleur, mesurée au spectophotomètre à 450nm est proportionnelle à la concentration d'acide hyaluronique.

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